人逆转录病毒包装细胞系Plat-E

产品名称:人逆转录病毒包装细胞系Plat-E

人逆转录病毒包装细胞系Plat-E收到货后处理

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的培养液收集至离心管中，加入6ml培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的培养基，另外一瓶用自己配的培养基）

人逆转录病毒包装细胞系Plat-E培养步骤

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

三、细胞冻存：（注：无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司货号：C7001）

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3、用适量的冻存液重悬细胞，并放置于冻存管中；

4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃

人逆转录病毒包装细胞系Plat-E部分产品：

YS3461CCRFS180II小鼠肉瘤成纤维细胞CCRFS180II

YS3462351小鼠杂交瘤细胞抗CD235.1

YS3463FreestyleCHOS中国仓鼠卵巢细胞Freestyle CHO-S

YS3464SH2小鼠B淋巴细胞白血病SH2

YS3465H1Hela人宫颈癌细胞H1 Hela

YS3466IPECJ2猪正常的肠上皮细胞IPEC-J2

YS3467CHO/DHFR中国仓鼠卵巢细胞CHO/DHFR

YS3468MEL（MEL745AclDS19）小鼠红白血病细胞MEL（MEL-745A cl. DS19）

YS3469JAWSⅡ小鼠骨髓（未成熟）树突状细胞JAWSⅡ

YS3470ZFL斑马鱼肝脏组织细胞ZFL

YS3471GM12882人B淋巴细胞GM12882

YS3472GM01176人成纤维细胞GM01176

YS3473GM50142人B淋巴细胞GM50142

YS3474GM50113人B淋巴细胞GM50113

YS3475GM11404人B淋巴细胞GM11404

YS3476GM23465人B淋巴细胞GM23465

YS3477GM01359人成纤维细胞GM01359

YS3478AG09802人B淋巴细胞AG09802

YS3479GM21833人B淋巴细胞GM21833

YS3480VK2/E6E7人阴道粘膜上皮细胞VK2/E6E7

YS3481GM02008人成纤维细胞GM02008

YS3482GM11115人成纤维细胞GM11115

YS3483GM13325人成纤维细胞GM13325

YS3484GM09326人成纤维细胞GM09326

YS3485GM00526人成纤维细胞GM00526

YS3486GM50152人B淋巴细胞GM50152

YS3487H197/IGFIR褐家鼠脑海马体成纤维细胞H19-7/IGF-IR

YS3490EO771小鼠髓样乳腺癌贴壁细胞EO771

YS3491GM03606唐氏综合症背景羊水来源细胞GM03606

YS3492BB71小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞BB7.1

YS3493BBM1小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞BBM.1

YS3494L243小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞L243

YS34954.00E+11小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞4E11

YS3496BB77小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞BB7.7

YS3497IGG6A6小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞IGG-6A6

YS349893F10小鼠（骨髓瘤）杂交瘤细胞9.3F10

YS3499NEGFP4C小鼠神经干细胞NE-GFP-4C

YS3500GM00325人成纤维细胞GM00325

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