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JIMT-1人乳腺癌细胞

更新时间:2025-03-14

简要描述:

细胞名称:JIMT-1人乳腺癌细胞
种属来源:人
性别年龄:女性,62岁
组织来源:乳腺
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
上海研尊生物细胞供应

型号:YZ-X1018点击量:98
品牌研尊生物货号YZ-X1018
规格1 X 106cells/T25或1 mL冻存管供货周期现货
主要用途科研实验

细胞名称JIMT-1人乳腺癌细胞

种属来源

性别年龄女性,62

组织来源乳腺

生长特性贴壁生长

细胞形态上皮细胞样

细胞规格1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件DMEM + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S

         37 , 5% CO2

冻存条件90% FBS + 10% DMSO

传代方法1:2-1:6传代, 2-3天传1代

细胞培养操作

干冰运输收到细胞后需立即转入液氮保存、或者-80°C冰箱短期冻存、或者直接复苏

常温运输收到细胞后,请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出,并按照下方操作步骤进行培养传代

细胞传代细胞密度达80% - 90%,即可进行传代培养

培养瓶中细胞操作步骤

对于贴壁培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培养瓶,以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。

  1. 收到细胞后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因为运输过程中存在颠簸,且有些细胞对温度变化也很敏感,可能存在一些细胞脱落漂浮的情况,这些细胞仍是活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。

  2. 对于贴壁细胞,在生物安全柜环境中,用真空泵去除培养瓶中多余的培养基,至剩余5-8mL 左右,随后根据培养基选择合适的CO2含量的37恒温培养箱中培养,拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶,请立即传代。

  3. 对于悬浮的细胞,在生物安全柜环境中,转移培养瓶中的细胞至离心管,150 g 离心 5 分钟,去除上清后,用5 mL培养基吹散细胞,转移至新的培养瓶中,随后置于合适的CO2含量的37恒温培养箱中培养。

冻存管细胞操作步骤

注意: 为保证细胞的高活率,请收到产品后,立即解冻培养。

  1. 将冻存管置于37水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约1分钟。

  2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。

  3. 将冻存管中的液体转移到含有5mLwan全培养基的离心管中,150 g 离心 5 分钟,用真空泵去除上清。

  4. 用wan全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37水浴预热后使用。

  5. 将细胞置于含有合适CO2的37恒温培养箱中培养。

贴壁细胞传代培养

  1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基,加入PBS润洗一次。

  2. 加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,并置于37℃培养箱中孵育,直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3-5分钟。

  3. 加入2mL全培养基中和胰蛋白酶,并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落,并使细胞分散。

  4. 将细胞悬液收集到15mL离心管里,150 g 离心 5 分钟,用真空泵去除上清。取适量的培养基将细胞重悬,转移到新的培养瓶中培养。

悬浮细胞传代可参考以下方法:

一、直接传代法

  1. 待悬浮细胞长满至 80%~90%(细胞悬液变黄),即可传代;

  2. 吸管吸弃细胞悬液 1 / 2~1 / 3;

  3. 加入适量的新鲜培养基,继续培养。

    二、离心传代法(在发现有细胞碎片的情况下)

  4. 将细胞悬液转移到离心管内;

  5. 150 g 离心 5 min,弃去上层清液;

  6. 使用新鲜的培养基重悬细胞;

  7. 吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。

细胞冻存操作

  1. 1000rpm离心5分钟去掉上清。加1 mL血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1 x 106/mL,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识

  2. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80°C冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。

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